葡萄酒纸层析法是一种利用物质在固定相和流动相之间分配差异进行分离的技术，常用于葡萄酒品质鉴定和成分分析。以下是具体步骤及注意事项：
一、实验材料与仪器
材料 - 纸层析纸（建议使用25cm×14cm规格）
- 展开剂（如酒精、醋酸等有机溶剂）
- 标准品（如已知浓度的葡萄酒或氨基酸标准溶液）
- 微量注射器或毛细管
仪器
- 层析缸（圆形或长方形玻璃缸）
- 支架或玻璃悬钩
二、实验步骤
滤纸准备
- 取滤纸，一端画一条平行线作为原点，每隔2-3cm做标记，共设置3-4个点。
- 将滤纸卷成筒状，用订书机固定，确保两侧平整且不接触容器底部。
点样
- 用微量注射器或毛细管吸取标准品或待测葡萄酒，点样点直径不超过5mm，点样后待干再复点。
- 点样位置通常选择在原点或中间线，避免溶剂侵蚀滤纸边缘。
展层操作
- 将滤纸放入层析缸中，展层剂液面低于点样线1cm，避免接触缸壁。
- 开启溶剂流动（如加热或倾倒展开剂），待溶剂上升15-20cm时取出滤纸，用铅笔描出溶剂前沿界线。
结果观察与分析
- 记录各斑点的位置（Rf值）、颜色和形状，与标准品对比。
- 通过Rf值计算物质含量，或通过斑点纯度判断葡萄酒品质。
三、注意事项
溶剂选择
- 根据待分离物质选择展层剂，如葡萄酒分析常用酒精或醋酸，氨基酸分析需特定有机溶剂。
操作规范
- 点样时避免溶剂飞溅，滤纸需干燥且无褶皱。
- 展层时保持溶剂流速均匀，避免局部过流影响分离效果。
结果解读
- Rf值： 标准品Rf值已知，待测样品Rf值可对比判断纯度。 - 斑点形态
四、应用场景
葡萄酒鉴别：通过Rf值和斑点特征判断是否为真品，或检测掺假色素。
成分分析：如氨基酸分析，可同时分离Lys、Gly等常见氨基酸。
通过规范操作和结果分析，纸层析法可有效辅助葡萄酒品质评估及成分鉴定。
